業內動態
常見的口蹄疫病毒診斷檢測技術
發布時間:2020-05-09 10:56:10
口蹄疫病毒
口蹄疫病毒(FootandMouthDiseaseVirus,FMDV)屬于小RNA病毒科,口蹄疫病毒屬??谔阋?FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)感染引起的偶蹄動物共患的急性、熱性、接觸性傳染病,最易感染的動物是黃牛、水牛、豬、駱駝、羊、鹿等;黃羊、麝、野豬、野牛等野生動物也易感染此病。世界動物衛生組織(OIE)將其列為法定報告動物傳染病之一,我國也將FMD列為一類動物疫病。
我國《2019年國家動物疫病監測與流行病學調查計劃》中強調要對口蹄疫高風險區云南、廣西、貴州、廣東和新疆;重點省份河北、河南、湖北、湖南、江蘇、福建、浙江、安徽、江西、四川、山西、陜西等12省份的豬、牛、羊進行重點監測。
病原流行特點
口蹄疫病毒目前有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3(即南非1、2、3型)和Asia1(亞洲1型)7個血清型。各型之間幾乎沒有免疫保護力,感染了一型口蹄疫的動物仍可感染另一型口蹄疫病毒而發病??谔阋咴趤喼?、非洲和中東以及南美均有流行,在非流行區也有散發病例。診斷口蹄疫可以根據臨床癥狀、病理變化、血清學和分子生物學檢測結果。
檢測標準
口蹄疫檢測標準(現行)
臨床癥狀
易感動物臥地不起或跛行,??梢姶袅⒘飨?。
易感動物唇部、舌面、齒齦、鼻鏡、蹄踵、蹄叉、乳房等部分出現水泡。
發病后期,水泡破潰、結痂,嚴重者蹄殼脫落,恢復期可見瘢痕、新生蹄甲。
傳播速度快,發病率高;成年動物死亡率低,幼畜常突然死亡且死亡率高,仔豬場成窩死亡。
實驗室檢測診斷
口蹄疫診斷檢測技術正在不斷地改進和創新,已從細胞培養、血清學診斷技術領域擴展到了分子生物學診斷技術領域。這些新技術不僅敏感、特異,而且還簡便、快速、高通量化。 今天我們就主要介紹兩種常用的檢測技術。 (一)病原檢測-熒光熒光定量反轉錄聚合酶鏈式反應 熒光實時定量聚合酶鏈式反應就是通過對聚合酶鏈式反應擴增反應中的每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。在其反應中引入了一種熒光化學物質,隨著聚合酶鏈式反應反應的進行,聚合酶鏈式反應反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的,從而得到熒光擴增曲線圖。相比常規聚合酶鏈式反應技術,熒光實時定量聚合酶鏈式反應的特異性強,靈敏度高,可直接對產物進行定量,自動化程度高,操作簡單,亦解決聚合酶鏈式反應污染問題。目前已得到廣泛應用。
(二)抗體檢測-酶聯免疫吸附試驗
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的基礎是抗原的固相化及抗體的酶標記。ELISA方法是抗體檢測最常用方法之一,該方法具有操作簡單、快速、敏感性高、特異性強等優點,可用于疫苗免疫抗體的檢測。其中非結構蛋白3ABC抗體間接/阻斷酶聯免疫吸附試驗還可特異性鑒別檢測口蹄疫病毒野毒感染情況。
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