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            產品目錄

            白鯊Biosharp BL926A DiD (細胞膜遠紅外熒光探針)

            品名: 白鯊Biosharp BL926A DiD (細胞膜遠紅外熒光探針)
            型號: BL926A
            • 產品詳情
            • 規格參數

            產品簡介:

            DiD,DiO,DiIDiR染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏色區分明顯:DiI色熒光),DiO(綠色熒光),DiD熒光)和 DiR (深紅色熒光),這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。

            DiDDiI的類似物,但具有更長的激發和發射波長,為遠紅外熒光,在一些細胞和組織染色中更有優勢,特別適合用于進行多種熒光的同時染色。DiD可被633nm的氦-氖激光所激發,DiD在進入細胞膜之前熒光非常弱,僅當進入到細胞膜后才可以被激發出很強的熒光。DiD被激發后可以發出遠紅外的熒光,最大激發波長為644nm,最大發射波長為663nm。

            DiD被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

            DiD染色后可以兼容免疫熒光實驗。建議使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黃皂苷配制的不會溶解細胞膜的通透液進行通透,其它去垢劑配制的通透液可能會溶解細胞膜上的脂類物質,造成DiD失去結合位置,最終導致DiD的染色失效。但通透也可能會影響DiD在細胞膜上的定位并會增加細胞內的染色,具體實驗中需根據實驗的需求選擇合適的細胞通透液。

             

            產品信息:

            英文名:DiIC18(5); 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate

            分子式:C61H99ClN2O4

            分子量:959.91

            純度:≥95%

             

            使用方法僅供參考

            一、DiD細胞膜染色液制備

            1.配置DMSOEtOH 儲存液:用DMSOEtOH配置濃度1-5 mM的儲存液。

            2.工作液制備:用合適的緩沖液(如無血清培養基,HBSSPBS)稀釋儲存液,配制濃度為1-5 μM的工作液。

            注:工作液的最終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制,可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。  

            二、細胞染色

            a.對于懸浮細胞

            1.懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。

            2.37℃培養細胞520分鐘,不同的細胞最佳培養時間不同。

            3.1000-1500rpm離心5分鐘。

            4.去除上清,再次緩慢加入37℃預溫的培養液。

            5.重復步驟34,兩次以上。

            b.對于貼壁細胞

            1.去多余的培養液。

            2.加入染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

            3.37 ℃培養細胞 520分鐘,不同的細胞最佳培養時間不同。

            4.染料工作液,用培養液清洗23次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,培養510分鐘,然后吸干培養基。

            、結果分析

            顯微鏡下觀察或流式細胞儀檢測

             

            注意事項

            1、熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

            2、本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。

            3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

             

            保存條件:

            -20℃干燥避光保存,有效期一年。



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